据西藏大学农牧学院耿向永等（2009年）报导，灵芝的人工培育在1960年现已成功，但在西藏未见灵芝培育的报导，首要原因是对灵芝在西藏培育所需求的环境不了解和不易取得灵芝菌种所造成的。实验选用西藏野生灵芝安排别离法取得灵芝菌种并进行判定，为在西藏进行灵芝的人工培育进行了讨论。

1．供试灵芝

西藏野生灵芝，采自林芝县百巴乡雪巴农场的腐生树上。

2．实验办法

（1）培育基配方　马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂20克，KH2P04 3克、MgSO41.5克，维生素B110毫克，水1000毫升。

（2）制造办法　马铃薯去皮、切碎、称重，置沸水中煮20分钟左右，以马铃薯在水中金奥力破壁灵芝孢子粉胶囊的防伪码煮烂为准。用2层纱布过滤揉捏取其汁置于烧杯中，一起参加其他物质拌和煮沸，加水定容至1000毫升，pH值天然。培育基制造完取其适量倒入试管中，棉塞封口，置高压灭菌锅中，121℃维持30分钟，待高压锅中气压降至0后，取试管置于无菌操作台中制备斜面培育基，待用。

（3）菌种别离　选取未构成子实体的野生稚嫩灵芝，用自来水冲刷外表泥土，取其菌柄和菌褶衔接部分置于75%酒精中消毒10秒，用无菌水按浸泡—→冲刷—→（换无菌水）浸泡—→冲刷—→再冲刷的流程，将菌体外表和内部的酒精洗掉。

消毒后的菌体置于无菌培育皿中，用无菌剪刀剪开灵芝，将其内部菌肉剪成黄豆粒大小的菌块，将菌块接种于斜面培育基上。

接种结束后将斜面培育基放入培育箱中，保持温度24～28℃，湿度60%～65%，避光培育并调查菌块成长状况。

（4）菌种成长测定　当令培育后，在无菌条件下挑取斜面培育基上纯洁的菌丝，接种于新的斜面培育基上，用来制备灵芝母种并测定菌丝成长速度，取其部分菌丝制造水片，于显微镜下调查菌丝形状。灵芝母种培育条件：于人工气候培育箱中，温度24～28℃，湿度60%～65%，避光培育。

（5）出菇实验　母种制备成功后，为了判定母种纯度及验证菌种是否具有出菇才能，有必要做出菇实验。灵芝出菇实验选用的培育基是木屑麸糠培育基。

①制造办法：桦木木屑78%、麦麸20%、石膏粉1%、蔗糖1%。桦木木屑和麦麸按以上份额称重后，混匀再加水调和，石膏粉和蔗糖可先加水溶解再拌入猜中。加水量视木屑粗细而异，结构紧密、质地较细的木屑，加水量宜少；结构疏松、质地较粗的木屑，加水量宜多。

②调节水分：加水后用塑料布裹严，让水充分进入木屑和麦麸中。堆闷0.5小时左右打开塑料布调查培育基含水量，取一些培育根据手中，用手握紧培育基，以水从指缝间溢出但不成滴落下为宜。一般保持在60%～65%，实验所用原种培育基含水量为65.4%。

③装瓶：培育基的含水量分配适合后，便能够进行装瓶。出菇瓶一般能够用500毫升的广口瓶或细口的绿色瓶，装瓶的要求是培育料在瓶中要外紧内松，一起在装满出菇瓶的时分，可用食指左右粗细的棒槌在培育基中间钻1个孔，这样有利于菌种在培育基内部的有氧成长。

④灭菌接种：装瓶后用双层牛皮纸或棉花球将瓶口封住，装入高压灭菌锅中，在121%下维持1.5小时或2小时，一般是以能够闻到木屑特有的香味为准。高压灭菌后将原种瓶放入无菌操作台中进行接种。接种的要求是取适量的母种（可带母种培育基），敏捷接入原种瓶中事前钻好的孔灵芝的生活习性　（一）地理分布灵芝品种多样，分布广泛。我国大部分省份均有分布，一般适宜300—600米海拔高度山地生长，特别是热带、亚热带杂木林下均可找到它的踪迹。洞中。

⑤发菌：接种后在温度24～28℃、湿度60%～65%下避光培育。

⑥出菇培育：待原种瓶中菌丝开端长满整个原种瓶时并能见到小的原基时，便能够将瓶口的棉花团或牛皮纸去掉，将出菇瓶放入人工气候箱中培育。培育条件是温度24～28℃，湿度75%～80%，避光。

3．实验成果

（1）菌种别离成果　灵芝外植体菌块在马铃薯归纳培育基中通过4～6天培育，便可看到灵芝菌块上有白色棉絮状灵芝菌丝长出。由于菌丝别离选用的办法是安排别离，所以第1次接种培育的菌块周围往往有杂菌成长。为了取得纯洁的菌种，需在菌块产菌后，用接种针从菌块上小心挑取灵芝菌丝，接种于新的斜面培育基中培育。

通过适合条件的培育，灵芝菌丝在斜面培育基上长势杰出，菌丝紧贴培育基外表呈状成长，从第4天开端沿试管内部爬壁成长，培育基外表的菌丝也开端规整成长，菌丝成长敏捷，试管内的菌落开端增厚。培育10地利，整个培育基斜面长满灵芝菌丝，菌丝皎白纯洁，粗大健壮有力，菌苔较厚，菌丝浓密，阐明菌丝成长生机旺盛，适合作为母种运用。培育12地利，菌丝开端向培育基内部成长，使得整个培育基中都长满菌丝。

（2）灵芝菌丝的显微调查　为了判定别离到的菌丝是灵芝菌种，需求先对其进行显微调查，办法是用接种针挑取单菌丝制造水镜片后在显微镜下调查；首要看到的是担子菌的特征。一起能够看到大而显着的锁状联合，所谓锁状联合，是指在双核菌丝对夏天养生大有裨益。现在就给老人们介绍几款适合夏天喝的汤茶.　　枸杞防暑茶　　·原料：枸杞10g，薄荷3g，五味子12g，菊花6g.　　·做法：把所有原料放入杯中，冲入300ml开水，加盖闷10分钟即可饮用.　　·功效：补生津，暑热烦渴.　　的横隔膜处发作的一个具有特征性的侧生突起，往往发作在菌丝顶部双核细胞的两核之间。它是双核菌丝细胞分裂的一个特殊形式，通过锁状联合，二个双核细胞变成两个双核细胞。锁状联合的存在阐明，别离到的菌种是双核的有生殖才能的菌种，并能看到菌丝发作细微的分枝菌丝，分枝菌丝的存在阐。

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